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如何对鸡新城疫进行实验室检测?

栏目:养殖方法作者:天凤凰时间:2024-07-16 16:47:10
以下是一些针对鸡新城疫进行实验室检测的常见方法:1.病毒分离与鉴定- 样品采集:采集病死鸡的脑、肺、脾、肝、肠内容物等组织器官作为检测样本。- 处理样品:将...

以下是一些针对鸡新城疫进行实验室检测的常见方法:

 

1. 病毒分离与鉴定

 

- 样品采集:采集病死鸡的脑、肺、脾、肝、肠内容物等组织器官作为检测样本。

- 处理样品:将采集的病料组织剪碎、研磨,加入生理盐水制成悬液,经离心、过滤除菌等处理后备用。

- 鸡胚接种:将处理后的病料接种于 9 - 11 日龄的鸡胚尿囊腔,置于 37℃恒温箱孵育,每日照蛋 2 次,弃去 24 小时内死亡鸡胚,收集 24 - 96 小时死亡鸡胚的尿囊液。

- 血凝(HA)试验:对收集的尿囊液进行血凝试验,如果出现血凝现象,表明可能存在新城疫病毒。

- 血凝抑制(HI)试验:用已知的新城疫病毒标准阳性血清对上述有血凝性的尿囊液进行血凝抑制试验,如果血凝被抑制,即可确诊新城疫病毒的存在。

2. 血清学检测

 

- 血凝抑制试验(HI):采集鸡的血清,用已知的新城疫抗原测定血清中的抗体水平。抗体滴度达到一定数值以上可作为新城疫感染或免疫的证据。

- 酶联免疫吸附试验(ELISA):利用新城疫病毒的特异性抗原包被酶标板,加入待检血清,通过酶标抗体和显色反应来检测血清中的新城疫抗体,可用于群体鸡群的抗体检测和监测。

3. 分子生物学检测

 

- 反转录 - 聚合酶链式反应(RT - PCR):提取病料中的病毒 RNA,经反转录成 cDNA 后,进行 PCR 扩增。如果能扩增出新城疫病毒特异性基因片段,可诊断为新城疫病毒感染。

- 实时荧光定量 PCR(qPCR):该方法比普通 PCR 更加灵敏、快速,能够对样品中的新城疫病毒核酸进行定量检测。

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