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除了琼脂免疫扩散试验,还有哪些血清学检测方法可用于鉴别鸡新城疫病毒和禽流感病毒?

栏目:养殖方法作者:天凤凰时间:2024-07-16 17:06:30
除了琼脂免疫扩散试验外,以下血清学检测方法也可用于鉴别鸡新城疫病毒和禽流感病毒:1.血凝抑制试验(HI试验):- 原理:新城疫病毒和禽流感病毒表面的血凝素可...

除了琼脂免疫扩散试验外,以下血清学检测方法也可用于鉴别鸡新城疫病毒和禽流感病毒:

 

1. 血凝抑制试验(HI试验):

 

- 原理:新城疫病毒和禽流感病毒表面的血凝素可以与红细胞表面受体结合,引起红细胞凝集;特异性抗体与病毒表面的血凝素结合后,会抑制病毒对红细胞的凝集作用。

- 操作:先制备病毒抗原,然后将待检血清进行系列稀释后与固定量的病毒抗原混合,加入红细胞悬液,观察红细胞的凝集情况。如果待检血清中有特异性抗体,会抑制病毒的血凝活性,表现为不凝集。通过比较血清对新城疫病毒抗原和禽流感病毒抗原的血凝抑制效价,判断血清中针对相应病毒的抗体情况,从而进行鉴别。

2. 酶联免疫吸附试验(ELISA):

 

- 间接ELISA:将新城疫病毒和禽流感病毒的抗原分别包被在酶标板上,加入待检血清,孵育后洗去未结合的抗体,再加入酶标记的抗鸡抗体,孵育、洗涤后加入底物显色,根据显色强度判断血清中抗体水平,以此鉴别。

- 竞争ELISA:将新城疫病毒和禽流感病毒的特异性抗体包被在酶标板上,加入待检血清和酶标记的相应病毒抗原,待检血清中的抗体与酶标抗原竞争结合包被抗体,通过显色强度判断血清中抗体的存在和含量,进行鉴别诊断。

3. 中和试验:

 

- 原理:待检血清中的特异性抗体与病毒作用后,使病毒失去感染细胞的能力。

- 操作:将待检血清进行系列稀释后分别与固定量的新城疫病毒和禽流感病毒混合,加入到细胞培养板中的细胞单层上,培养一段时间后观察细胞病变情况,计算能保护50%细胞不产生病变的血清稀释度,即中和抗体滴度,根据抗体滴度鉴别感染的病毒类型。

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